一、技术原理

    circRNA-seq是一种针对环状RNA（circRNA）的高通量测序技术。circRNA是一类特殊的非编码RNA分子，它们具有闭合的环状结构，不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴，因此比线性RNA更为稳定。

二、实验流程

Step1：RNA提取与纯化

Step2：去除rRNA

Step3：线性RNA消化

Step4：cDNA合成

Step5：cDNA库构建

Step6：高通量测序

Step7：数据分析

三、技术总结

保证样品的纯度和完整性，避免降解和污染；

考虑实验的重复次数、对照组的设置、样本的选择和处理等因素；

需要选择合适的测序深度；

由于样品之间可能存在测序深度的差异，需要进行数据标准化处理，以便比较不同样本的基因表达水平；

选择合适的分析流程和参数对于获得准确的结果至关重要，避免过度解释或错误解释数据。

四、样本要如何准备？

血液样本：样品需使用EDTA抗凝，体积≥10 mL，干冰运输；

组织样本：动物组织量≥100 mg，植物组织量≥500 mg，干冰运输；

细胞样本：细胞数1×10^7个，可以是细胞液或细胞沉淀，干冰运输。

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