一、技术原理 

    在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。

二、实验流程

Step1：蛋白-DNA 交联

Step2：细胞裂解

Step3：通过消化或声处理剪切来进行染色质碎裂

Step4：使用特异性抗体进行免疫沉淀

Step5：清除 DNA 以进行下游分析

Step6：通过 PCR、qPCR、微阵列或 NGS 进行 DNA 分析

三、结果展示

四、技术总结

根据不同的细胞类型和目标蛋白进行优化交联时间和甲醛浓度；

超声碎裂染色质的条件(如超声时间和功率)需根据实验需要调整；

使用前需验证抗体的特异性和亲和力，确保其能特异性识别目标蛋白而非特异性蛋白或背景信号；

免疫沉淀过程中，抗体和蛋白A/G磁珠的比例、孵育时间需要精确控制；

根据实验需求调整洗涤液的种类和次数，确保背景信号最小化。

五、样本要如何准备？

细胞样本：细胞数1×10^7个，可以是细胞液或细胞沉淀，干冰运输；

组织样本：组织量≥100 mg，干冰运输。

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