CRISPR/CAS9系统基因敲除-广州复锐西科生物医药科技有限公司

CRISPR/CAS9系统基因敲除

【简介】
CRISPR/CAS9系统是一种革命性的基因编辑技术，以前所未有的精确度对基因组进行修改。

详细内容交付标准

一、技术原理

CRISPR/Cas9系统源自细菌的适应性免疫系统，用于防御病毒入侵。在基因编辑中，Cas9酶与设计好的单导向RNA（sgRNA）结合，形成复合体，该复合体能够识别并切割特定的DNA序列，从而在基因组中产生双链断裂（DSB）。细胞通过非同源末端连接（NHEJ）或同源定向修复（HDR）机制修复这些断裂，引入插入或缺失（indels）突变，或插入特定的DNA序列。

二、实验流程

Step1：设计sgRNA

Step2：构建表达载体

Step3：细胞转染

Step4：筛选和鉴定

Step5：功能验证

三、技术总结

需要提供足够数量的目的细胞；

细胞应无污染，生长状态良好；

根据实验要求对细胞进行适当处理。

四、样本要如何准备？

活细胞：选取状态良好且快要长满的细胞（大约 2×10^7），将细胞瓶内灌满完全培养基，打包时必需做防震处理，常温寄送。细胞株干冰运输，冻存管完全被干冰覆盖，做好防震处理。

R 高清原始图片

R 鉴定结果报告

R 冻存管细胞/复苏细胞

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