一、技术原理
CCK-8试剂中的WST-8，可在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被活细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物；用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞量（一定范围内生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比）。
二、实验方法
Step1：细胞培养及状态调整；
Step2：铺板；
Step3：过夜培养，待细胞贴壁及稳定；
Step4：药物处理；
Step5：呈色：避光加CCK-8溶液，孵育37℃ 1-4 h；
Step6：上机检测：CCK8-450nm；
Step7：分析数据：以OD值或细胞相对存活率作图。
注：如研究某基因对细胞增殖能力的影响，采取先转染后铺板的原则。
三、结果展示
四、技术总结
铺板密度不合理，均匀度不一致；
实验分组不严谨；
实验设置时间点不合理；
CCK8加样时注意事项不明确；
血清等影响：高浓度血清或药物颜色会影响试验孔的吸光度值；
边缘效应：边缘孔的水分挥发较快，药物易被浓缩。
五、样本要如何准备？
新鲜样品：0.1g新鲜组织（至少）或者加入蛋白裂解液，干冰运输；
细胞：细胞类型样本细胞数为1x10^6以上，干冰运输；
全血/血清样本：用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓1~3ml； -80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。
