一、技术原理
JC-1是一种荧光染料,能够在线粒体中积累并形成多聚体。在线粒体膜电位较高时,JC-1形成红色的J-聚集体,发出红色荧光;而在线粒体膜电位较低时,JC-1以单体形式存在,发出绿色荧光。因此,通过检测红色和绿色荧光的相对强度,可以评估线粒体膜电位的变化。
二、实验流程
Step1:细胞处理
Step2:JC-1染色
Step3:检测分析
三、结果展示
四、技术总结
JC-1对光敏感,注意避光操作;
染色时间不宜过长,以免影响细胞状态;
染色过程中应保持37°C,以确保JC-1的最佳性能。
五、样本要如何准备?
选取状态良好且快要长满的活细胞(大约 2×10^7),将细胞瓶内灌满完全培养基,打包时必需做防震处理,常温寄送。细胞株干冰运输,冻存管完全被干冰覆盖,做好防震处理。
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