一、技术原理
TRAP染色基于抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性,这是一种在破骨细胞中特异性表达的酶。在酸性条件下,TRAP能够将萘酚AS-BI磷酸盐水解,产生的萘酚AS-BI与显色剂结合形成红色沉淀,从而实现对破骨细胞的可视化。
二、实验流程
Step1:样本固定
Step2:TRAP染色液染色
Step3:封片
Step4:观察和分析
三、结果展示
四、技术总结
确保固定液的量充足,固定时间适当,以保持细胞形态;
染色过程中避免光线直射,因为某些组分可能对光敏感;
染色液的pH值需要准确,以确保酶活性;
染色时间需要严格控制,过长或过短都可能影响染色效果。
五、样本要如何准备?
组织样本:组织量≥100 mg,干冰运输;
石蜡切片:常温运输;
冰冻切片:干冰运输。
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