一、实验原理

    当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在agarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。

二、实验步骤

Step1：样品制备

Step2：加入A蛋白的IP抗体

Step3：免疫复合物沉淀

Step4：洗脱与检测蛋白

三、结果展示

四、技术总结

为了获取高质量的沉淀样品，必须使用浓缩并清晰的裂解液萃取样品；

所选抗体的特异性和亲和力直接关系到复合物的提取效率和准确性；

根据抗体选择相应固相材料(如蛋白A和蛋白G)可以加强Co-IP沉淀效果，减少耗时和工作量；

盐度、pH值、温度等离子体条件的优化，可以有效提高Co-IP实验的信号与噪声比，提高实验准确度；

通过Western blotting测定，并结合质谱技术等其他检测手段来确认，从而就能较全面地解析其结构和功能。

五、样本要如何准备？

细胞样本：细胞数1×10^7个，可以是细胞液或细胞沉淀，干冰运输；

组织样本：组织量≥100 mg，干冰运输。

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