一、技术原理
细胞瞬转技术是一种常用的分子生物学实验方法,用于将外源DNA或RNA导入真核细胞,以研究基因表达和功能。
二、实验流程
Step1:质粒构建
Step2:细胞复苏培养
Step3:质粒转染入细胞
Step4:检测相关靶点的表达
三、结果展示
四、技术总结
确保实验操作在无菌条件下进行;
转染试剂与DNA的比例需要优化,以获得最佳转染效率;
避免在转染过程中使用抗生素,因为它们可能降低细胞活性,影响转染效果;
转染后细胞的培养条件(如温度、CO2浓度)需要与细胞系的培养要求相匹配。
五、样本要如何准备?
质粒或菌株:质粒不少于2 μg或甘油菌约100 μL,低温运输;
质粒DNA:体积≥50 μL,浓度≥300 ng/μL,低温运输;
活细胞:选取状态良好且快要长满的细胞(大约 2×10^7),将细胞瓶内灌满完全培养基,打包时必需做防震处理,常温寄送。细胞株干冰运输,冻存管完全被干冰覆盖,做好防震处理。
R 高清原始图片
R 鉴定结果报告
R 冻存管细胞/复苏细胞