一、造模方法
细胞准备:
①选择适合的肿瘤细胞系,确保细胞处于健康生长状态;
②收集细胞时,取处于对数生长期的细胞,细胞达80-90%左右密度为宜。
裸鼠选择:
①一般选择4-6周龄的裸鼠,体重约18-20g;
②确保裸鼠健康,无特定病原体;
接种部位:选择血供丰富区域,如腋窝中后部、腹股沟中上部等。
接种操作:
①用酒精消毒注射部位;
②左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤,小拇指夹住裸鼠尾巴;
③用1ml注射器吸取细胞悬液,45度斜角进针,将细胞悬液注射至皮下。
后续观察:定期观察肿瘤生长情况,记录肿瘤大小。
二、结果展示
三、技术总结
确保细胞活力好,无污染,特别是支原体污染,这会影响肿瘤生长和结果的可重复性;
不同细胞系、不同的小鼠和接种位置所需要的细胞剂量会有差异,建议开展预实验确定最佳细胞注射剂量;
裸鼠对饲养环境的要求很高,必须饲养在SPF级屏障设施内,避免病原体感染;
伦理考虑:实验过程中遵守动物福利和伦理规定;
肿瘤不宜生长过大,一般不要超过1000mm³,以免影响动物福利;
数据记录:详细记录肿瘤生长情况和动物状态,以便于后续分析;
注射时确保针头在皮下适当深度,减少注射后细胞悬液从针眼溢出。
R 裸鼠成瘤照片
R 肿瘤照片
R 肿瘤体积曲线
R 肿瘤质量
R 病理HE染色
R 免疫组化
R 免疫荧光
R qPCR
R WB
R ELISA
R 小鼠活体成像
R 测序服务