一、技术原理
耐药株构建的原理是通过逐步增加药物浓度或药物冲击,诱导细胞产生耐药性。细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,如细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受。随着药物浓度的递增,细胞的耐受程度逐渐加强。
二、实验流程
Step1:检测初始细胞系的IC50
Step2:初始药物培养
Step3:药物浓度递增
Step4:耐药性检测
三、结果展示
四、技术总结
确保实验操作在无菌条件下进行;
药物浓度递增应循序渐进,避免细胞因药物浓度过高而死亡;
定期检查细胞的生长情况,以确保它们保持耐药性;
建立耐药细胞系的过程可能需要长时间和大量的努力,结果也可能是不可预测的。
五、样本要如何准备?
选取状态良好且快要长满的活细胞(大约 2×10^7),将细胞瓶内灌满完全培养基,打包时必需做防震处理,常温寄送。细胞株干冰运输,冻存管完全被干冰覆盖,做好防震处理。
R 高清原始图片
R 鉴定结果报告
R 冻存管细胞/复苏细胞