一、技术原理
原理在于检测细胞膜表面磷脂酰丝氨酸(PS)的翻转,以及通过结合特定染料来区分正常细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞。
二、实验流程
Step1:细胞收集
Step2:细胞处理
Step3:细胞染色
Step4:流式细胞仪检测
Step5:数据分析
三、结果展示
四、技术总结
使用不含EDTA的胰酶消化细胞,避免假阳性结果;
设置合适的对照,如单阳对照组细胞,以确保实验结果的准确性;
避免使用对细胞有自发荧光的试剂;
对照组凋亡细胞比例不宜过多。
五、样本要如何准备?
选取状态良好且快要长满的活细胞(大约 2×10^7),将细胞瓶内灌满完全培养基,打包时必需做防震处理,常温寄送。细胞株干冰运输,冻存管完全被干冰覆盖,做好防震处理。
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