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 EdU
【简介】
EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)是一种用于检测DNA合成的核苷类似物,它可以在细胞增殖过程中替代胸腺嘧啶掺入到新合成的DNA中。
详细内容 交付标准

一、技术原理

    EdU在DNA复制过程中被整合到新合成的DNA中,然后通过与荧光标记的叠氮化物发生共价反应,形成稳定的三唑环,从而通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到细胞增殖。  

二、实验流程

Step1:细胞处理

Step2:EdU标记

Step3:细胞固定

Step4:通透处理

Step5:EdU显色

Step6:细胞核染色

Step7:观察分析

三、结果展示

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四、技术总结

EdU的孵育时间应根据细胞类型和实验需求进行优化;

EdU和荧光标记的叠氮化物对光敏感,实验过程中应避光处理;

在每次染色步骤后,应充分洗涤以去除未结合的染料;

在细胞操作过程中应轻柔,避免对细胞造成损伤。

五、样本要如何准备?

选取状态良好且快要长满的活细胞(大约 2×10^7),将细胞瓶内灌满完全培养基,打包时必需做防震处理,常温寄送。细胞株干冰运输,冻存管完全被干冰覆盖,做好防震处理。

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