一、实验原理
蛋白免疫印迹（Western Blot）是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
二、实验方法
Step1: 蛋白样品裂解，细胞需提前裂解
Step2: SDS-PAGE凝胶电泳
Step3: 转膜
Step4: 免疫反应
Step5: 化学发光
Step6: 结果分析
三、结果展示
四、技术总结
当进行接触滤纸、凝胶和膜的操作时，应戴手套。手上的油脂会阻断转移；
滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡，气泡会造成短路；
因为PVDF膜的疏水性，膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中，膜也必须随时保持湿润（干膜法除外）；
滤纸可以重复利用，上层滤纸（靠膜）内吸附有很多转移透过的蛋白质，所以上下滤纸一定不能弄混，在不能分辨的情况下，可以将靠胶滤纸换新的；
转移时间一般为1.5 小时，( 1mA-2mA/cm2，10% gel)，可根据分子量大小调整转移时间和电流大小。
五、样本要如何准备？
新鲜样品：0.1g新鲜组织（至少）或者加入蛋白裂解液，干冰运输；
细胞：细胞类型样本细胞数为1x10^6以上，干冰运输；
全血/血清样本：用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓1~3ml； -80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。
