一、技术原理
小动物活体成像技术主要包括生物发光(Bioluminescence)和荧光(Fluorescence)成像两种技术。生物发光成像是利用荧光素酶基因标记细胞或DNA,通过其与底物反应在动物体内产生光信号。荧光成像则是利用如绿色荧光蛋白(GFP)、红色荧光蛋白(RFP)等荧光报告基因或荧光染料进行标记。
二、实验流程
①生物发光
Step1:选择合适的荧光素酶
Step2:载体构建
Step3:建立稳转细胞系
Step4:细胞注射动物
Step5:注射底物
Step6:活体成像
②荧光标记
Step1:选择合适的荧光染料
Step2:荧光标记
Step3:活体成像
三、结果展示
四、技术总结
曝光时间的选择会影响信号与背景噪音的平衡;
背景荧光的控制,如黑色素等的自发荧光,可能会影响检测灵敏度和特异性;
根据实验要求和动物伦理选择适宜的麻醉剂的选择和使用;
正确选择ROI区域,以提高数据分析的准确性。
R 活体成像图
R 组图及分析
R 实验结果报告