一、技术原理
天狼星红染料与胶原纤维中的碱性基团结合,形成稳定的复合物。这种复合物在偏振光下能显示出明显的双折射色,有助于区分不同类型的胶原纤维,如Ⅰ型和Ⅲ型胶原。
二、实验流程
Step1:固定切片
Step2:脱蜡水化
Step3:天狼星红染液染色
Step4:0.5%稀乙酸快速漂洗
Step5:脱水
Step6:透明化
Step7:封片
三、结果展示
四、技术总结
切片厚度控制在6~7μm,以便在偏振光镜下显示清晰;
天狼星红染色液配制时,衬染液应为过饱和溶液;
复染胞核时推荐使用Mayer苏木精液,以免影响胶原纤维的显色;
避免温度剧烈变化,造成溶液变质,随用随取。
五、样本要如何准备?
FFPE样本:FFPE组织块,低温运输;
冷冻切片:冷冻组织块,干冰运输。
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