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mRNA-seq

【简介】
mRNA-seq（mRNA测序）技术是一种高通量的基因表达分析方法，它通过测序技术对细胞中的mRNA进行定量分析，揭示基因表达水平、剪接变体、非编码RNA等信息。

详细内容交付标准

一、技术原理

核心原理是将样品转换为cDNA库，然后通过高通量测序技术对这些cDNA进行测序。

二、实验流程

Step1：RNA提取与纯化

Step2：RNA片段化与逆转录

Step3：cDNA库构建

Step4：高通量测序

Step5：数据分析

三、技术总结

保证RNA的纯度和完整性，避免RNA降解和污染；

考虑实验的重复次数、对照组的设置、样本的选择和处理等因素；

需要选择合适的测序深度；

由于样品之间可能存在测序深度的差异，需要进行数据标准化处理，以便比较不同样本的基因表达水平；

选择合适的分析流程和参数对于获得准确的结果至关重要，避免过度解释或错误解释数据。

四、样本要如何准备？

血液样本：样品需使用EDTA抗凝，体积≥2.5 mL，干冰运输；

组织样本：动物组织量≥100 mg，植物组织量≥500 mg，干冰运输；

细胞样本：细胞数2×10^6个，可以是细胞液或细胞沉淀，干冰运输。

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