一、技术原理
PAS染色的基本原理是利用过碘酸(periodic acid)将细胞中的多糖类物质氧化,生成醛基,然后这些醛基与Schiff试剂中的无色品红结合,形成紫红色的复合物,从而实现对多糖的可视化。
二、实验流程
Step1:固定切片
Step2:脱蜡水化
Step3:高碘酸氧化
Step4:Schiff试剂染色
Step5:分化与漂洗
Step6:苏木精复染
Step7:脱水
Step8:透明
Step9:封片
三、结果展示
四、技术总结
确保玻片干净无杂质,避免因玻片污染而影响实验结果;
过长的染色时间可能导致背景染色过深影响观察,染色时间过短则可能使多糖物质染色不充分;
染色过程中,温度的变化可能影响染色效果;
每次染色后,都需要用蒸馏水充分冲洗玻片,以去除多余的染料;
冲洗时,要确保水流柔和,避免损坏组织切片。
五、样本要如何准备?
FFPE样本:FFPE 组织块,低温运输;
冷冻切片:冷冻组织块,干冰运输。
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