一、技术原理
LncRNA-seq的原理与mRNA-seq类似，主要包括RNA的提取与纯化、RNA片段化、逆转录成cDNA、cDNA库构建、高通量测序和数据分析等步骤。不过，LncRNA-seq特别关注于lncRNA的捕获和分析，通常采用去除rRNA的方法进行建库，以富集lncRNA并排除其他类型的RNA，如mRNA和rRNA。
二、实验流程
Step1：RNA提取与纯化
Step2：去除rRNA
Step3：RNA片段化
Step4：cDNA合成
Step5：cDNA库构建
Step6：高通量测序
Step7：数据分析
三、技术总结
保证样品的纯度和完整性，避免降解和污染；
考虑实验的重复次数、对照组的设置、样本的选择和处理等因素；
需要选择合适的测序深度；
由于样品之间可能存在测序深度的差异，需要进行数据标准化处理，以便比较不同样本的基因表达水平；
选择合适的分析流程和参数对于获得准确的结果至关重要，避免过度解释或错误解释数据。
四、样本要如何准备？
血液样本：样品需使用EDTA抗凝，体积≥10 mL，干冰运输；
组织样本：动物组织量≥100 mg，植物组织量≥500 mg，干冰运输；
细胞样本：细胞数1×10^7个，可以是细胞液或细胞沉淀，干冰运输。
