一、技术原理
MTT(噻唑蓝)，可透过细胞膜进入细胞内，活细胞线粒体中的脱氢酶能使外源性MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶并沉积在细胞中，而死细胞无此功能；结晶物能溶于DMSO中，通过酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，间接反映活细胞数量（一定范围内，OD值越大，细胞活性越强）。
二、实验方法
Step1：细胞培养及状态调整；
Step2：铺板；
Step3：过夜培养，待细胞贴壁及稳定；
Step4：药物处理；
Step5：呈色：避光加MTT溶液，37℃孵育4 h，孵育完成后除尽孔内上清，每孔加150μL DMSO，振荡10min；
Step6：上机检测：MTT-490nm
Step7：分析数据：以OD值或细胞相对存活率作图。
注：如研究某基因对细胞增殖能力的影响，采取先转染后铺板的原则。
三、结果展示
四、技术总结
铺板密度不合理，均匀度不一致；
实验分组不严谨；
实验设置时间点不合理；
MTT加样时注意事项不明确；
血清等影响：高浓度血清或药物颜色会影响试验孔的吸光度值；
边缘效应：边缘孔的水分挥发较快，药物易被浓缩。
五、样本要如何准备？
新鲜样品：0.1g新鲜组织（至少）或者加入蛋白裂解液，干冰运输；
细胞：细胞类型样本细胞数为1x10^6以上，干冰运输；
全血/血清样本：用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓1~3ml； -80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。
